Toplam Tiyol Tayini için Yeni Bir Spektrofotometrik Yöntem Geliştirilmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: İstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa, Lisansüstü Eğitim Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı Başkanlığı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Emine Münevver Görüşük
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Mustafa Reşat APAK
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Biyotiyoller, insan vücudunda fizyolojik ve biyokimyasal süreçte önemli rol oynamaktadırlar. Hücresel tiyol seviyesindeki anormal değişimler Alzheimer, diyabet, AIDS, kardiyovasküler hastalıklar ve kanser gibi birçok hastalıkla bağlantılıdır. Bu yüzden, biyotiyolleri kantitatif olarak belirleyebilen yöntemlerin geliştirilmesi hastalıkların oluşumunu önlemek açısından son derece önemlidir. Bu tez çalışmasında, biyotiyollerinin spektrofotometrik tayini için modifiye ABTS-Persülfat yöntemi geliştirilmiştir. Geliştirilen bu yöntem, biyotiyollerin, çözelti içinde mavi-yeşil olan ve maksimum 734 nm'de absorbansa sahip, ABTS radikal katyonunu renksizleştirme yeteneğine dayanır. Optimum deney koşulları (pH, sıcaklık, zaman) Box-Behnken tasarımı kullanılarak belirlenmiştir. Optimum şartlar pH 8, sıcaklık 600C ve zaman 60 dk olarak elde edilmiştir. Geliştirilen modifiye ABTS-Persülfat yöntemi ve modifiye Ellman yöntemi kullanılarak indirgenmiş glutatyon, yükseltgenmiş glutatyon, N-asetil sistein, sistein, sistin, homosistein, homosistin ve sisteamin gibi biyotiyol bileşiklerin tayini yapılmıştır. Her bir biyotiyol bileşiği için molar absorplama katsayıları, lineer çalışma aralıkları belirlenmiştir. Geliştirilen yöntem, sentetik serum örneklerine uygulanarak kesinlik, doğruluk parametreleri test edilmiştir. Geliştirilen modifiye ABTS-Persülfat yönteminde biyotiyollerin gözlenebilme sınırları (LOD) 1.30x10-7 M ile 8.25x10-7 M arasında bulunmuştur. Referans yöntem olarak kullanılan modifiye Ellman yönteminde ise 9.33x10-7 M ve 1.55x10-5 M arasında bulunmuştur. Geliştirilen modifiye ABTS-Persülfat yöntemi ve modifiye Ellman yöntemi için, ikili, üçlü ve dörtlü sentetik karışımlar hazırlanarak N-asetil sistein eşdeğeri cinsinden teorik ve deneysel tiyol içerikleri değerlendirilmiştir. Geliştirilen modifiye ABTS-Persülfat yöntemi kullanılarak polifenolik bileşikler varlığında biyotiyollerin tayini yapılmış ve bulgular HPLC yöntemi ile karşılaştırılmıştır. Geliştirilen modifiye ABTS yöntemi ile ilaç örneklerindeki tiyol içerikleri belirlenmiş ve bulgular modifiye Ellman ve HPLC yöntemi ile karşılaştırılmıştır.